10. Tumorové markery

11.hCG rychlý těhotenský test z moči (vysoce citlivý)
Indikace - podezření na graviditu, vyšetření před vybranými výkony
Materiál k vyšetření - ranní moč
Princip stanovení - imunochromatografie s využitím immobilizovaných monoklonálních protilátek
Interpretace vyšetření - vysoce citlivé testy (citlivost 25-50 IU hCG/l)detekují spolehlivě graviditu v ranní moči již v den vynechavších menses. Musí s vysokou spolehlivostí detekovat i případy ektopické gravidity a těhotenských patologií. Vysoká citlivost testu vylučuje falešně negativní výsledky, vysoká specifita testu vylučuje falešně pozitivní výsledky. Zejména vynechání menses u žen v perimenopause klade velké nároky na specifitu testu (vysoké hladiny imunologicky podobného hormonu hLH v moči).

12. s-hCG kvantitativně
Indikace - monitorování ohroženého těhotenství (ab. imminens, missed ab.), vícečetného těhotenství, patologie časného těhotenství (hydatidosní mola až choriokarcinom)
Materiál k vyšetření - srážlivá krev.
Princip stanovení - vysoce citlivá chemiluminiscenční metoda
Interpretace vyšetření - stoupající hladiny hCG s vrcholem v 8-12 týdnu gravidity (viz referenční hodnoty)
jsou známkou normálního metabolismu placenty, hladiny stagnující či klesající ve výše uvedeném období časné gravidity mohou znamenat ohrožení gravidity. Některé patologie plodového vejce vykazují naopak často extrémně vysoké hladiny hCG v periferní krvi (např. hydatidosní mola).

13. Screening metabolitů drog v moči
Indikace - podezření na abusus drog
Materiál k vyšetření - moč
Princip stanovení - imunochromatografická metoda
Interpretace vyšetření - testy poskytují screeningový průkaz hlavních metabolitů barbiturátů opiátů, amfetaminu/methamfetaminu, kokainu, benzodiazepinů, tricyklických antidepresiv, methadonu, tetrahydrocannabinolu (5 metabolitů), cannabinolu,cannabidiolu. Potvrzení výsledku musí být následně ještě provedeno dalšími specifickými analytickými metodami.

14.Quickův čas (protrombinový, tromboplastinový čas)
Druh použitého tromboplastinu velmi ovlivňuje hodnoty tromboplastinových testů (nestandardní výsledky), což je možným zdrojem omylů při kontrole léčby. Proto byl zaveden způsob přepočtu hodnot tromboplastinového testu pro používání různých tromboplastinů.

Normální hodnoty testu INR 0.7-1.25

Terapeutické rozmezí antikoagulační léčby vyjádřené v INR
INR 2-2.5 Prevence hluboké žilní trombózy včetně rizikových chirurgických a ortopedických operací.
INR 2-3.0 Operační výkony kyč.kloubů a fraktury femuru, plicní embolie.
INR 3-4.5 Recidiv.žilní trombózy a plicní embolie, tepenná onem. včetně IM, cévní štěpy.

15. Lymeská borrelióza-vyšetření protilátek

Indikace - příznaky onemocnění či podezření na onemocnění Lymeskou borreliózou
Materiál k vyšetření - sérum

Lymeská borrelióza (LB) je kosmopolitní onemocnění vyvolané spirochétou Borrelia burgdorferi sensu lato přenášené klíšťaty rodu Ixodes ricinus. Nejčastějším původcem onemocnění v našich podmínkách jsou Borrelia garinii a Borrelia afzelii. B.afzelii má vztah k onemocnění kůže, B.garinii k postižení centrální nervové soustavy. Klinická manifestace je však různorodá a často je postiženo více orgánů. Především se jedná o nervový systém (meningitida, meningoradikulitida), projevy kožní (erythema chronicum migrans, lymfocytom a další), kardiovaskulární systém (myokarditida, vaskulitida), pohybový aparát (arthritida, myositida), oční projevy (konjunktivitida, keratitida), neuropsychické změny. Průběh onemocnění lze zhruba dělit na fázi akutní dny až týdny po infekci (vrchol IgM protilátek mezi 3-6 týdnem), stádium diseminace agens – týdny až měsíce a následné chronické stádium.

Včasná diagnostika a léčba zejména akutních infektů zabrání nežádoucímu přechodu onemocnění do chronické formy, kdy je specifická terapie podstatně méně účinná. Současná diagnostika hodnotí klinické projevy, epidemiologickou anamnézu a průkaz specifických protilátek.

a) ELISA – detekce protilátek proti Borrelia garinii a afzelii (K přípravě antigenu v ELISA soupravách jsou použity sonifikované kmeny Borrelia garinii event. Borrelia afzelii s vysokým obsahem specifických antigenů). Výsledky jsou hodnoceny semikvantitativně (tj. výsledek negativní, hraniční, pozitivní), u hraničních a pozitivních výsledků je udáván index pozitivity, který umožňuje hodnotit hladiny IgM a IgG protilátek v průběhu onemocnění.

Vyšetření protilátek ELISA metodou je považováno za orientační a je méně specifické nežli technika Western Blot. Jeho výhodou je možnost hodnotit dynamiku protilátek v čase.

b) Western Blot – detekce protilátek (IgM a IgG) proti významným genospecies borrelií
Nová rekombinantní verze testu rozšiřuje detekci i na další druhy borrelií vyskytující se v Evropě. Jsou vyšetřovány čtyři pro člověka patogenní druhy uplatňující se jako kausální agens lymské borreliózy se v Evropě: Borrelia afzelii, B.garinii, B.burghoferi sensu stricto a B.spielmanii. Zatímco dříve se v našich podmínkách vyskytovaly spíše B.afzelii a garinií, v současnosti je již popisován i výskyt dalších výše uvedených evropských druhů. Velmi časté turistické pobyty našich občanů v zahraničí znamenají zvýšené riziko onemocnění dříve méně frekventními druhy borrelií. Některé homologní proteiny těchto čtyř druhů borrelií se vzájemně liší. Proto jsou v novém testu pro každý druh borrelie (viz obrázek) odděleně vyšetřovány. Nedochází proto ke zkreslení výsledku ani u méně frekventních genospecies borrelií. Dalším vylepšením je detekce poměrně nově charakterizovaného povrchového proteinu umožňujícího v tomto provedení testu detekci všech evropských druhů Borrelií - VlsE (variable major protein-like sequence, expressed), který je exprimován pouze in vivo - tedy poté co borrelie infikuje hostitele. Detekce VlsE představuje velký pokrok pro diagnózu borreliózy.

Podrobnější informace k vyšetření jsou uvedeny níže. Další odstavce níže slouží pouze k detailní informaci, výsledek bude lékaři vydáván ve formě jasného závěru, jehož varianty jsou uvedeny v Tab.3.
Pokud jde o účtování pojišťovně, nemění se - je shodné jako doposud - detekce IgM všech genospecies 1 x kód 91399, detekce IgG všech genospecies 1x kód 91399.

Klinická manifestace onemocnění je různorodá a často je postiženo více orgánů. B.afzelii má vztah k onemocnění kůže, B.garinii k postižení centrální nervové soustavy, B. burgdoferi sensu stricto se projevuje často kloubním postižením. V případě B. spielmanii je popisováno erythema migrans. U těchto onemocnění se především jedná o nervový systém (meningitida, meningoradikulitida), projevy kožní (erythema chronicum migrans, lymfocytom a další), kardiovaskulární systém (myokarditida, vaskulitida), pohybový aparát (arthritida, myositida), oční projevy (konjunktivitida, keratitida), neuropsychické změny.
Serologický výsledek závisí na individuální interakci hostitele, trvání příznaků, stadiu onemocnění a možné antibiotické léčbě. V případě neurologických projevů zůstává důležitým diagnostickým kritériem detekce intratekálně syntetizovaných protilátek. Průběh onemocnění lze zhruba dělit na fázi akutní dny až týdny po infekci (vrchol IgM protilátek mezi 3-6 týdnem), stádium diseminace agens – týdny až měsíce a následné chronické stadium.

Výsledky testu a interpretace:
Základem pro spolehlivé a jednoduché vyhodnocení testu je bodové ohodnocení antigenů borrelií, které vychází z klinického hodnocení a matematické analýzy. Výsledek testu je dán součtem bodů a následným vyhodnocením. Výsledek testu se určí součtem bodů pro jednotlivé antigeny. Na základě počtu bodů se stanoví pozitivní, hraniční nebo negativní výsledek vzorku.

Tab. 3: Vyhodnocení testu

Pokyny pro interpretaci výsledků:
Negativní výsledek detekce specifického IgG nebo IgM nevylučuje infekci Borrelia burgdorferi. Zejména v časné fázi infekce nemusí být protilátky ještě přítomny nebo jejich množství není pro detekci dostačující. Léčba antibiotiky v časné fázi může zabránit tvorbě protilátek. Při klinickém podezření na lymeskou borreliózu a negativním nebo sporném výsledku vyšetření séra je doporučeno provést za dva týdny nový odběr séra a opakovat vyšetření.
Ve vzorcích odebraných v časné fázi infekce obvykle převládají protilátky třídy IgM. Pro časnou imunitní odpověď (IgM) je charakteristická reakce s OspC.
U vzorků odebraných v pozdních fázích infekce (IgG) se objevuje jeden nebo více z následujících proužků: p100, VlsE, p58, p39 a p18. Protilátky proti OspA se objevují zřídka. VlsE je časným markerem imunologické odpovědi ve třídě IgG, ale často se objevuje i při pozdních projevech lymeské borreliózy, kdy se vyskytuje současně s p100 a/nebo p18.
Pozitivní výsledek specifického IgG v testu neznačí aktivní lymeskou borreliózu, je nutné současné vyšetření protilátek třídy IgM. Protože protilátky IgG přetrvávají dlouhou dobu, mohou být stále detekovatelné po dříve prodělané infekci Borrelia burgdorferi.
Zkřížená reaktivita s protilátkami proti patogenům vyvolávajícím syfilis (Treponema pallidum) nebo leptospirózu (Leptospira sp.) je v používaném WB testu minimalizována selektivním použitím rekombinantních antigenů Borrelia burgdorferi. Při aktivní infekci syfilis nebo v případě serologické pozitivity na syfilis byly příležitostně detekovány protilátky proti antigenu p41. U nejasných serologických výsledků proti borreliím by měla být vyloučena syfilis. U infekční mononukleózy (Pfeifferova nemoc, EBV infekce) se může objevit polyklonální stimulace B lymfocytů. To může vést k nespecifickým reakcím v testech detekujících protilátky třídy IgM. Pokud není anamnéza jasná a je přítomna slabá odpověď ve třídě IgM, je doporučeno diferenciálně diagnosticky vyloučit EBV infekci.
Výsledky serologického testování by vždy měly být hodnoceny v souladu s klinickým obrazem. Pokud jsou serologické výsledky nejasné nebo sporné, měl by být test v průběhu infekce opakován.

16. Močový sediment - vyjadřování v arbitrárních jednotkách

Snahy o standardizaci vedou v současné době k požadavku vyjadřování výsledků vyhodnocení močového sedimentu jako počet elementů na objemovou jednotku 1 µl (mikrolitr). Na toto vyjadřování budou laboratoře dle doporučení výborů odborných společností postupně přecházet.

DŘÍVE - byl uváděn výsledek jako počet elementů na zorné pole. Počet elementů pak znamenal buďto normální nález nebo stupeň závažnosti patologického nálezu v arbitrárních jednotkách (a.j.) - viz níže tab. DŘÍVE.

NYNÍ - pro lékaře a jeho diagnostickou rozvahu se nic nemění. Je obdobný počet kategorií nálezu, kde 0 a.j. znamená normální nález, 1 a.j. mírně zvýšený počet elementů až postupně k 4 a.j. jako vysoce patologickému nálezu - viz tab. NYNÍ. Co se mění je pouze kvalita nálezu odpovídající arbitrárním jednotkám. Např. námi používaný přístroj vyhodnocuje celkem pět set jednotlivých digitálních fotografií pro každou moč a hodnotí dle morfologie částice sedimentu. Počet hodnocených elementů samozřejmě mnohonásobně přesahuje možnosti původního mikroskopického stanovení.

NYNÍ:

17. Rotaviry a adenoviry ve stolici

Indikace - průjmovité onemocnění s rychlým a prudkým nástupem, zejména u dětí do 5 let
Materiál k vyšetření - pro vyšetření je nutný vzorek stolice velikosti hrášku, zaslaný ve sterilním kontejneru.

18. Chlamydie protilátky

Indikace - příznaky onemocnění či podezření na onemocnění infekcí zapříčiněnou Chlamydia pneumoniae či Chlamydia trachomatis
Materiál - srážlivá krev.

Chlamydie jsou intracelulární parazité způsobující u lidí široké spektrum onemocnění. Pro člověka jsou významné zejména druhy Chlamydia pneumoniae, Ch.trachomatis a Ch.psittaci. Infekce Ch.psittaci je v našem státě málo frekventní.

Chlamydia pneumoniae: příznaky onemocnění – projevuje se primárně jako onemocnění dýchacích cest tj. symptomaticky jako faryngitida, kašel či rýma, únava, nechutenství, často považována za chřipku. Onemocnění středního ucha-otitis media může mít též podklad této infekční etiologie. Sekundárně jsou popisovány reaktivní artritidy v důsledku bronchopulmonální infekce, je diskutována účast chlamydií v etiologii arteriosklerózy, roztroušené sklerózy (jako externí spouštěcí faktor u geneticky predisponovaných jedinců). Pokud není onemocnění diagnostikováno a léčeno, dochází ve většině případů k přechodu onemocnění do chronicity a persistenci agens. Dále viz poznámku č. 26 níže respirační infekce.

Chlamydia trachomatis: příznaky onemocnění – u primoinfekce je onemocnění často bez příznaků nebo nepříliš výrazná symptomatologie. Onemocnění má sklon k chronicitě, vzhledem k relativně vysoké promořenosti populace jsou časté reinfekce. Zanedbání adekvátní léčby vede často k vážným následkům.

U žen způsobuje agens uretritidu, cervicitidu, endometritidu, adnexitidu, agens proniká i do dutiny břišní a může se projevit např. jako periapendicitida. Zánětlivé změny v popsaných lokalitách se projevují bolestí (hluboký pánevní zánět) a ve svých důsledcích mohou vést k primární či sekundární sterilitě. Sterilita může být způsobena jak mechanicky (neprůchodnost vejcovodů, srůsty) tak autoimunitními procesy (předpokládá se že Ch.trachomatis je zodpovědná za polovinu všech případů). Při porodu může též docházet k infekcím novorozenců (konjunktivitida, pneumonie).
U mužů způsobuje agens uretritidu, prostatitidu a epididymitidu.
U obou pohlaví se jako důsledek onemocnění Ch.trachomatis může manifestovat reaktivní artritida.

V případě onemocnění se u Ch.pneumoniae i Ch.trachomatis jako první objevují protilátky IgM, následují protilátky IgA a IgG. Pro konfirmaci infekce je někdy nutné provést opakování vyšetření za 2-6 týdnů.

19.Tetanus protilátky

Indikace - Kvantitativní stanovení protilátek třídy IgG proti tetanu.
Materiál - srážlivá krev.
Interpretace - pod 0.1 IU/ml nutná základní imunizace i v případě, že již proběhla v minulosti jr nutné přeočkování
0.1-0.5 IU/ml nutné přeočkování
0.6-1.0 IU/ml kontrola hladiny protilátek po 2 letech
1.1-5.0 IU/ml kontrola hladiny protilátek po 5-10 letech
nad 5.0 IU/ml kontrola hladiny protilátek po 10 letech

20. Klíšťová encefalitida – protilátky

Původcem závažného onemocnění CNS - klíšťové encefalitidy je virus klíšťové encefalitidy, přenašečem je klíště, inkubační doba 7-14 dní. Onemocnění s často dvoufázovým průběhem začíná horečnatým onemocněním, trvajícím asi týden. Poté následuje období relativní úlevy s následnou fází vysoké teploty a příznaky meningoencefalitidy. Nemoc má dlouhodobý průběh s často přetrvávajícími neurologickými nálezy. Vysoké procento onemocnění též probíhá zcela bez klinické manifestace.
Indikace

• Vyšetření IgM a IgG - potvrzení a sledování průběhu onemocnění, diferenciální diagnóza
  Průkaz protilátek třídy IgM je potvrzením diagnózy onemocnění, postupná tvorba IgG protilátek se objevuje cca 2-4 týdny od počátku druhé fáze onemocnění.
• Vyšetření IgG – stanovení protilátek před případným očkováním

21. Mycoplasma pneumoniae protilátky

Na etiologii respiračních infekcí, které jsou dnes nejčastějším onemocněním v komunitě, se podílí velké množství virů a bakterií. Významné procento tvoří infekce způsobené Mycoplasma pneumoniae a Chlamydia pneumoniae. Incidence Mycoplasma pneumoniae u komunitních pneumonií je cca 30%, infekce Chlamydia pneumoniae tvoří asi 10%. Infekce se šíří aerosolem vzdušnou cestou, pouze mezilidským kontaktem. Infekce Mycoplasma pneumoniae způsobuje onemocnění respiračního traktu s často vleklým průběhem s výskytem tracheobronchitid cca v 10% přecházejících v atypických pneumonií s protrahovaným průběhem, teplotami, nevolností, neproduktivním kašlem. Může překvapit závažný rtg nález u jinak symptomaticky nevýrazného onemocnění. Diagnostikovaná infekce je dobře léčitelná antibiotiky.
Materiál - srážlivá krev.
Interpretace výsledků: